免疫組化中IHC vs ICC的區(qū)別。英瀚斯生物為您說明。除了生物學(xué)來源,IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化,要么通過固定過程,要么是單獨(dú)的透化步驟,這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟,這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理,才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品,IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當(dāng)然,就染色而言,根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的。免疫組化結(jié)果分析是什么?福建免疫組化怎么樣
免疫組化實驗所用的組織和細(xì)胞標(biāo)本是什么樣的?
實驗所用主要為組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本兩大類,前者包括石蠟切片(病理大片和組織芯片)和冰凍切片,后者包括組織印片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片。其中石蠟切片是制作組織標(biāo)本**常用、**基本的方法,對于組織形態(tài)保存好,且能作連續(xù)切片,有利于各種染色對照觀察;還能長期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中優(yōu)先的組織標(biāo)本制作方法。
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免疫組化結(jié)果背景染色較深的原因有哪些?
(1)抗體濃度過高:一抗?jié)舛冗^高是常見的原因之一。解決辦法是,每次使用新抗體前應(yīng)當(dāng)對其工作濃度進(jìn)行測試,使每一抗體個體化,找到適合自己實驗室的理想工作濃度,既使是即用型的抗體也應(yīng)如此,不能只簡單的按說明書進(jìn)行染色。
(2)抗體孵育時間過長或溫度較高:解決辦法是,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程,比較好隨身佩帶報時表或報時鐘,及時提醒,避免因遺忘而造成時間延長?,F(xiàn)在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的時間不是傳統(tǒng)的1小時,而是30分鐘,因此,要根據(jù)染色結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。
(3)DAB變質(zhì)和顯色時間太長:DAB比較好現(xiàn)用現(xiàn)配,如有沉渣應(yīng)進(jìn)行過濾后再用。配制好的DAB不應(yīng)存放時間太長,因為在沒有酶的情況下,過氧化氫也會游離出氧原子與DAB產(chǎn)生反應(yīng)而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里幾天后再用這種似乎節(jié)約的辦法是不可取的。DAB的顯色比較好在顯微鏡下監(jiān)控,達(dá)到理想的染色程度時立即終止反應(yīng)。但是當(dāng)染**太多時或用染色機(jī)時,這樣做似乎不現(xiàn)實,但至少應(yīng)對一些新的或少用的抗體顯色時進(jìn)行監(jiān)控,避免顯色時間過長。
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免疫組化在在病理診斷中,隨著各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)及越來越多的新型抗體的出現(xiàn),免疫組化在cancer診斷及鑒別診斷、分類、預(yù)后判斷等方面產(chǎn)生了重大的影響。由于免疫組化技術(shù)也存在一些局限性,因此,深入研究免疫組化原理和技術(shù),并努力實現(xiàn)規(guī)范化的操作,才能充分發(fā)揮免疫組化在病理的診斷及鑒別診斷、判斷預(yù)后、指導(dǎo)臨床醫(yī)療中的作用。
觀察組織切片中抗原的數(shù)量及其在組織中的分布情況,對抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué),由于抗原與抗體特異性結(jié)合,因此通過免疫組化使標(biāo)記抗體的顯色劑(酶、熒光素、同位素、金屬離子等等)顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))。IHC所用標(biāo)本主要為兩大類:組織標(biāo)本和細(xì)胞標(biāo)本,其中制作組織標(biāo)本更常用、更基本的方法是石蠟切片。石蠟切片對于組織形態(tài)保存好,有利于各種染色對照觀察,而且能長期保存;石蠟切片中使用的甲醛固定劑對組織內(nèi)抗原暴露有一定的影響,但可進(jìn)行抗原修復(fù),是免疫組化中優(yōu)先選擇的組織標(biāo)本制作方法。 動物、細(xì)胞的免疫組化、免疫熒光,就找英瀚斯生物!
確定cancer分期,免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進(jìn)行處理哦,英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預(yù)后的一個指標(biāo),與是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分,用于區(qū)分原位*和浸潤*,一旦上皮性*突破基膜為浸潤,未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對血管或淋巴管的浸潤。因此對許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤,免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。英瀚斯生物,專業(yè)病理染色切片平臺,免疫組化效果好!新疆組織免疫組化哪家好
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免疫組化的定量分析怎么做?
免疫組化的定量分析是通過圖像分析軟件對顯色結(jié)果進(jìn)行定量評估。免疫組化常用的方法有光密度分析和陽性細(xì)胞計數(shù)。光密度分析是通過測量顯**域的光密度值,評估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。免疫組化陽性細(xì)胞計數(shù)是通過計數(shù)顯色陽性的細(xì)胞數(shù)量,評估目標(biāo)蛋白的表達(dá)水平。定量分析需要考慮多個因素,如顯色強(qiáng)度、背景信號和切片厚度。此外,免疫組化定量分析的結(jié)果通常只能進(jìn)行半定量分析,不能提供***的定量數(shù)據(jù)。 福建免疫組化怎么樣