HE染色攻略：HE染色又稱為蘇木精-伊紅染色，染色后組織或細胞可以借助普通光學顯微鏡觀察與鑒別細胞凋亡與細胞壞死的一種染色方法。這種方法適用范圍***，對組織細胞的各種成分都可著色，便于***觀察組織構(gòu)造，而且適用于各種固定液固定的材料，染色后不易褪色可長期保存。經(jīng)過HE染色，細胞核被蘇木素染成藍紫色，細胞質(zhì)被伊紅染色呈粉紅色?？梢杂^察細胞結(jié)構(gòu)、組織層次等等。首先切片組織是否完整，組織有無損傷；然后看切片有無刀痕；***細胞核是否清晰可見，胞核與包漿要對比鮮明。HE染色 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。湖北結(jié)果客觀的HE染色外包

HE染色觀察細胞凋亡，凋亡檢測中形態(tài)學方法是**直觀、可靠的方法之一。對組織和各種細胞進行染色后，在光學顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下觀察，通過觀察細胞的形態(tài)或染色的類型來判斷凋亡的發(fā)生與否。細胞涂片或細胞甩片的制備：對于貼壁細胞，可將蓋玻片放于培養(yǎng)器皿中，讓培養(yǎng)細胞長于玻片上，然后用藥物誘導細胞凋亡后取出，用4%多聚甲醛固定5min。對于懸浮細胞，用藥物誘導細胞凋亡后，離心1000r/min收集細胞，用PBS洗2次，收集調(diào)整細胞數(shù)為1X105/ml，涂片或用離心甩片，用4%多聚甲醛固定5min；在光學顯微鏡下，貼壁細胞由原來的梭形或多角形變小、變圓，核呈藍色或藍黑色，胞漿呈淡紅色，核固縮、破碎，形成凋亡小體等。懸浮細胞，整個細胞皺縮，核固縮，破碎，形成凋亡小體，染色質(zhì)顏色加深等。遼寧靠譜的HE染色公司骨組織HE染色的操作流程。

HE染色細胞核灰藍原因：（1）組織處理溫度過高、過熱，在石蠟停留的時間過長；（2）固定時間太短，接下來就直接在高濃度的乙醇中行脫水處理。對策：理論上來說，加熱處理*在組織浸蠟步驟才使用，組織不能在熱的蠟液中停留過長時間。如果由于某些原因不能進行下步包埋處理，完成浸蠟處理后的組織，可將組織連同塑料包埋盒一并放置在室溫空氣中，冷卻凝固，以備包埋。待需要包埋時再重新加溫直至石蠟融化即可。組織在處理前必須確保固定良好，脫水比較好能從低濃度的乙醇開始。

HE染色多聚甲醛保存組織的注意事項：多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當?shù)南礈煲夯蛩疀_洗數(shù)小時仍會有殘留，因此后續(xù)實驗結(jié)果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或完全掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。冰凍切片是否可以做HE染色？

HE染色伊紅著色淡分析及應對原因：（1）伊紅染液的pH值可能大于5；（2）藍化液殘留過多；（3）切片太?。唬?）切片經(jīng)伊紅染色后在乙醇脫水時間過長。對策：檢查伊紅染液的pH值，如果必要的話，用乙酸將其調(diào)節(jié)在4～5之間，從而使伊紅染色彩艷麗。確保每次藍化步驟完成后，使用的弱堿性溶液被充分洗去，玻片上沒有殘留的弱堿性溶液。檢查切片的厚度。脫水時不要讓切片在低濃度乙醇停留時間過長，因為含水多的低濃度乙醇會將伊紅的顏色分化掉。HE染色小攻略技巧分析。陜西比較好的HE染色價格

石蠟組織切片的HE染色。湖北結(jié)果客觀的HE染色外包

HE染色常見問題：Q3：細胞核染色過淺，顏色暗淡答：切片在蘇木素染液中停留過短，或蘇木素過度氧化失效，或分化時間太長。對策：重新染色。將組織切片放入0.01%氫氧化鈉、0.5%氨水、飽和的碳酸氫鈉溶液、乙醇溶液，每個3-5min即可，接著重新染色。可以適當?shù)亟M織的嗜堿性以增強核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中3h，自來水沖洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氫鈉溶液中1h，自來水沖洗10min染色。Q4：細胞核染色過深，胞漿著藍色答：切片在蘇木素染液中停留過長；或切片太厚；或分化時間太短。這種情況首先鏡下看看切片厚度(比較好厚度1-2層細胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，專業(yè)的病理染色實驗服務(wù)平臺。湖北結(jié)果客觀的HE染色外包