1.細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點是成分復(fù)雜，來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細(xì)胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。M199特別適用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)，也常用于病毒學(xué)、以及大鼠胰腺上皮細(xì)胞和小鼠晶狀體組織的培養(yǎng)。河南iclean細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

    RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的，現(xiàn)在已應(yīng)用于各種正常細(xì)胞培養(yǎng)，包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞，是培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基。江蘇DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng)，但其在溶液中不安定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細(xì)胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發(fā)的降解。細(xì)胞運用其機制是：在細(xì)胞培訓(xùn)時，細(xì)胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細(xì)胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收運用。細(xì)胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像，連續(xù)的將低濃度水準(zhǔn)的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢匀《饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細(xì)胞，幾乎無須適應(yīng)，并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時間，縮減傳代次數(shù)，即節(jié)約了時間也節(jié)省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細(xì)胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細(xì)胞培育時細(xì)胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用，有效性推動細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需。

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng)，包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞，是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。

RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑，可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細(xì)胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定，不會自發(fā)的降解。 DMEM/F12：經(jīng)典雙培養(yǎng)基配方，為各類細(xì)胞提供均衡營養(yǎng)與穩(wěn)定生長環(huán)境。

    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成（采用平衡鹽溶液溶解）與合成培養(yǎng)基（如MEM細(xì)胞培養(yǎng)基）以1:1的比例混合使用。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清，培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的，但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等，這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外，血清含一些對細(xì)胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細(xì)胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細(xì)胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細(xì)胞生長，甚至造成細(xì)胞死亡。目前，血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用，使用濃度一般為5~20%，常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復(fù)雜，批間差異大及存在病毒等外源污染風(fēng)險，對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響，在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此，基于對血漿成份的分析，合成細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)運而生。合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基（minimalessentialmedium,MEM）。McCoy’s 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細(xì)胞建系，以及一些淋巴細(xì)胞和較難培養(yǎng)的細(xì)胞的培養(yǎng)。河南iclean細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

MCDB是為特定細(xì)胞設(shè)計的低蛋白和無血清培養(yǎng)的培養(yǎng)基。河南iclean細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，其中，青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細(xì)菌污染。本產(chǎn)品含有多類細(xì)胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。 河南iclean細(xì)胞培養(yǎng)基檢測

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